紫外分光光度計分為單光束和雙光束兩類。顧名思義,單光束型主要是依賴單束光進行測量。一束給定波長的光通過對照物,然后再通過實際樣品溶液,就能得到吸光結果。雙光束型則是通過一個斬光輪(mirrored chopper wheel)將一束光分成兩束,分別測量對照樣品和實際樣品。可以化光漂移(lamp drift)和減少測量時間。一些雙光型光度計不利用斬光輪,而是利用一種光束分光器來代替,將一束光分成兩束平行的光然后同時測量對照樣品和目的樣品。因為增加了測量的速度,所以雙光束分光光度計在測量一些溶液隨時間動態變化的研究中大有用處。
紫外分光光度計應該如何校準?
1、校準前,應使其開機預熱足夠時間安穩后進行,一般至少30min后進行。
2、選用規范物質時有必要注意應在規范值的復現條件(即規范物質規則的運用條件)下進行校準,否則會產生錯誤的校準結果。例如,運用GBW(E)130066分光光度計規范溶液進行校按時,有必要滿足兩個條件:
(1) 被校準儀器的光譜帶寬應該是2nm,若儀器光譜帶寬不能調理并大于2nm,則規范溶液給出的值不適用,應該選用修正值;
(2) 校按時所選用的兩只石英比色皿應該是內徑(10±0.2)mm,并且在235nm、257nm、313nm、350nm處,具有很好的配對性,這樣才干復現規范值。
3、運用規范溶液來校按時,還有必要特別注意校準丈量時的實驗室溫度,因為這些規范物質在不同溫度下有不同的透射比規范值。
4、規范用的規范物質有必要在說明書規則條件下保存,例如干涉濾光片應該保在枯燥潔凈的環境中,避免表面被污染、受潮開膠或霉變等。一切規范物質均應在證書上注明的有效期內運用。
5、紫外分光光度計選用的中性濾光片規范值的不確定度一定要符合傳遞規范。校按時,要注意規范濾光片的方向性。